葡萄糖怎么檢測才能檢測其中的含量?
來源:http://la-lin.cn 日期:2019-06-28 發(fā)布人:admin
氧化復(fù)原滴定法
氧化復(fù)原滴定法是指將待測樣品精細(xì)加碘滴定液后,邊振搖邊滴加NaOH 滴定液,在暗處放置30 min,加稀硫酸,用硫代硫酸鈉滴定液滴定,近終點(diǎn)時,加淀粉指示液繼續(xù)滴定藍(lán)色消逝,依據(jù)滴定液運(yùn)用量,計算葡萄糖的含量。該辦法在測定右旋糖酐40 葡萄糖注射液中葡萄糖的含量中被普遍采用。
碘-淀粉體系褪色光度法
碘與淀粉體系褪色光度法的原理是應(yīng)用葡萄糖復(fù)原性和碘與淀粉能構(gòu)成藍(lán)色配合物的性質(zhì)。待測液中參加適量NaOH 后,I2與NaOH 生成的NaIO 能定量地將葡萄糖氧化成葡萄糖酸,過量的NaIO 則歧化生成NaIO3和NaI。然后將體系調(diào)酸性,NaIO3與NaI 反響重重生成I2,析出的I2又與淀粉構(gòu)成藍(lán)色配合物。反響前后的吸光度差與參加的葡萄糖含量呈良好的線性關(guān)系,據(jù)此能夠測定葡萄糖的含量。
葡萄糖己糖激酶法
其原理是己糖激酶催化葡萄糖生成葡糖-6-磷酸。之后葡糖-6-磷酸被氧化,同時產(chǎn)生復(fù)原型β—煙酰胺腺嘌呤二核苷酸。系統(tǒng)將監(jiān)測340 nm的光吸收變化,該變化與樣品中的血糖濃度呈正比,依此計算并給出血糖濃度。
中紅外衰減全反射光譜法
葡萄糖在中紅外波段具有1152,1108,1 080,1 035,992 cm- 1 等5 個葡萄糖基頻特征吸收峰,因而,中紅外衰減全反射(ATR) 光譜辦法可以丈量濃度。采用中紅外ATR 光譜法,分別采集自然狀態(tài)和浸透狀態(tài)時皮下組織中的葡萄糖的光譜數(shù)據(jù),應(yīng)用二維關(guān)光譜技術(shù)剖析了兩種狀態(tài)下組織液中的葡萄糖濃度。結(jié)果標(biāo)明: 應(yīng)用低頻超聲和真空負(fù)壓等物理或化學(xué)輔助辦法將組織液浸透到皮膚表層,能夠完成中紅外ATR光譜法檢測皮下組織液中葡萄糖。
液相法
液相色譜( HPLC) 法是檢測生化分子的通用辦法,葡萄糖液能夠用此法測定。葛姍姍等人采用HPLC 法,測定紅腺忍冬葉水提液中葡萄糖的含量。12 批次紅腺忍冬葉的檢測結(jié)果標(biāo)明,該辦法能使葡萄糖和其它物質(zhì)得到良好的別離。線性范圍為33.75 -2 160 mg /L,精度為1.31 %,穩(wěn)定性分別為2.25 %,反復(fù)性為1.85 %,均勻加樣回收率為97.58 %。
應(yīng)用特異性互相作用
應(yīng)用特定物質(zhì)對葡萄糖分子的特異性辨認(rèn),能夠分離外表等離子體共振SPR)等技術(shù)停止測定。當(dāng)金膜外表配位體與剖析物發(fā)作互相作用,會招致SPR信號變化,從而停止測定。經(jīng)過特異性辨認(rèn)作用在SPR傳感器的金膜外表構(gòu)建了伴刀豆球蛋白A/葡聚糖修飾的金納米顆粒自組裝膜。當(dāng)有葡萄糖存在時,膜被合成,從而完成對葡萄糖的靈活檢測。結(jié)果標(biāo)明,該傳感器能夠選擇性地檢測0.1~100 mmol /L濃度范圍內(nèi)的葡萄糖溶液,且敏感膜能夠?qū)掖卧偕\(yùn)用。
酶法測定
葡萄糖氧化酶法葡萄糖氧化酶法原理如下: 葡萄糖被葡萄糖氧化酶氧化生成葡萄糖酸和H2O2,H2O2又經(jīng)辣根過氧化物酶作用,合成出氧,將無色的4-氨基安替比林和苯酚偶聯(lián)氧化,并縮合成紅色醌亞胺,其顏色深淺與葡萄糖濃度呈正比,在530 nm下的吸收峰度值會隨葡萄糖濃度的加而增加。應(yīng)用這一原理能夠測定葡萄糖含量。
葡萄糖氧電極法:葡萄糖氧電極法的原理是采用氧耗費(fèi)速率檢測葡萄糖,將氧電極置于含有適量葡萄糖氧化酶的溶液中,然后參加待測樣品,樣品中的葡萄糖被氧化而耗費(fèi)氧。由于氧耗費(fèi)量與血糖濃度呈正比,而電極的極限擴(kuò)散電流又與溶液中的氧含量呈正比,因而,氧電極值即可反映樣品中血糖濃度。采用電化學(xué)聚合技術(shù),用摻雜苯磺酸鈉的聚吡咯( PPy) 導(dǎo)電薄膜修飾鉛筆芯電極,在修飾電極外表吸附葡萄糖氧化酶制備了葡萄糖生物傳感器。該生物傳感器抗干擾才能強(qiáng)、穩(wěn)定性好,響應(yīng)電流和葡萄糖濃度在0~0.7 mmol /L 范圍內(nèi)有良好的線性相關(guān)度,靈活度為26.10 μA/mmol /L,均勻響應(yīng)時間約為6.5 s,檢測下限為47.2 μmol /L。
納米資料模仿酶比色法:葡萄糖氧化酶傳感器檢測葡萄糖濃度,具有專注性高、反響速度快等特性。但酶自身固有的不穩(wěn)定性,易受溫度、濕度以及pH 值等環(huán)境條件的影響而失去活性,而且葡萄糖氧化酶價錢昂貴、制備復(fù)雜,這在一定水平上限制了酶傳感器的應(yīng)用。應(yīng)用具備催化活性的納米資料,可以研制無酶葡萄糖傳感器?;贑eO2NPs 催化TMB 顯色反響與H2O2濃度的線性關(guān)系,構(gòu)建了測定血樣中葡萄糖的模仿酶比色剖析檢測辦法。他們合成了一種穩(wěn)定和水溶性的聚丙烯酸修飾的CeO2NPs,發(fā)現(xiàn)CeO2 NPs 可以催化H2O2氧化,表現(xiàn)出過氧化物模仿酶的催化活性。
無酶型葡萄糖電化學(xué)法:無酶葡萄糖電化學(xué)法也是不運(yùn)用葡萄糖氧化酶的葡萄糖測定辦法,具有較高的穩(wěn)定性、良好的重現(xiàn)性和本錢低廉等特性,近年來得到了快速開展。目前,曾經(jīng)有單一金屬( Pt,Pd,Au 等) 、雙金屬( Pt-Au,Pt-Pb,Pt-Ru,Pt-Bi,Pt-Ti 等) 及碳納米管、碳纖維、介孔碳等納米資料被用于無酶型葡萄糖電化學(xué)傳感器的研制。
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